文献类型：期刊文献

中文题名：轮状病毒P[6]基因型毒株LL4260株的VP8＊核心区蛋白的表达和纯化

英文题名：The expression and purification of VP8 ＊ core protein of the rotavirus P 16 ＊ Genotype LL4260

作者：王璐瑶[1];李丹地[2];孙晓曼[2];章青[2];王宏[2];庞立丽[2];胡继宏[1];段招军[2]

第一作者：王璐瑶

机构：[1]甘肃中医药大学公共卫生学院,兰州730000;[2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京102206

第一机构：甘肃中医药大学公共卫生学院

年份：2018

卷号：32

期号：2

起止页码：195

中文期刊名：中华实验和临床病毒学杂志

外文期刊名：Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology

收录：CSTPCD;;Scopus;CSCD:【CSCD2017_2018】；

基金：国家自然科学基金（81601813,81472003,31500139）

语种：中文

中文关键词：轮状病毒;P[6]基因型;VP8＊蛋白;蛋白表达与纯化

外文关键词：Rotavirus ; P[ 6 ] genotype ; VP8 ＊ core protein ; Protein expression and purification

摘要：目的为研究P[6]基因型轮状病毒受体结合特性，利用原核表达纯化得到P[6]基因型轮状病毒LL4260毒株的VP8＊核心区蛋白。方法将P[6]基因型毒株LL4 260株的质粒利用PCR扩增得到核心区基因片段，克隆到pET30a载体中构建重组质粒pET30a-LL4260VP8＊core，重组质粒转化到BL21（DE3）感受态细胞中进行蛋白表达，经亲和层析和分子筛层析纯化表达后得到目的蛋白。结果P[6]基因型轮状病毒LL4260毒株核心区pET30 a-LL4260VP8＊core蛋白为可溶表达，经纯化及电泳鉴定，得到相对分子质量为22×103的目的蛋白。结论本研究构建的P[6]基因型轮状病毒LL4260毒株pET30 a-LL4260VP8＊core重组质粒，表达纯化了相应核心区目的蛋白，为进一步分析蛋白的性能和结构提供基础。
Objective The VP8＊ core protein of rotavirus P[6 ] genotype LIA260 was purified by prokaryotic expression, which is important for further study of protein structure and function. Methods The P[6] genotype LL4260 strain was obtained by PCR. The recombinant plasmid pET30 a-LIA260VP8 ＊ core was inserted into pET30 a vector and transformed into BL21 （DE3） competent cells with the correct recombinant plasmid. The expressed protein is purified by affinity chromatography and molecular sieve chromatography. Results The pET30 a-LL4260VP8 ＊ core region protein is soluble in the supernatant and proteins of approximately 22 kDa are identified by eleetrophoresis using purified proteins. Conclusions In this study, LL4260 containing pET30 a-LIA260VP8 ＊ core plasmid was successfully constructed and LIA260 strain VP8 ＊ protein was expressed.