文献类型：学位论文

中文题名：水蛭素对特发性肺间质纤维化大鼠肺组织中纤溶酶原抑制剂-1(PAI-1)mRNA及蛋白表达的干预研究

作者：刘敏[1];

第一作者：刘敏

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：李红;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：特发性肺间质纤维化; 水蛭素; PAI-1

年份：2017

摘要：目的:观察水蛭素干预IPF大鼠肺组织中PAI-1mRNA及蛋白表达的作用,探讨水蛭素干预大鼠IPF的作用机制。方法:选取180只SPF级同月龄健康的Wistar大鼠,随机数字表法抽取18只大鼠作为空白(K)组,剩余162只大鼠气管内注射博莱霉素统一造模,造模成功后随机选取108只分为模型(M)组、激素(J)组、水蛭素高剂量(G)组、中剂量(Z)组、低剂量(D)组、水蛭素中剂量联合激素(ZJ)组,每组18只,造模后第2天开始给药,观察大鼠的一般情况,分别在造模后7天、14天、28天处死大鼠并收集标本,观察大鼠肺组织形态学及病理学变化,采用Western blot法检测大鼠肺组织中PAI-1的蛋白表达,RT-qPCR法检测PAI-1的基因表达。结果:1.大鼠一般情况:M组大鼠一般情况最差,且逐渐恶化,表现为大鼠精神状态越来越差,活动量、饮食量日益减少,呼吸频率加快,皮毛无光泽,第28天大鼠出现竖毛。所有处理组中,ZJ组大鼠一般情况最好,且呈逐渐好转趋势。D组大鼠整体状态仅仅次于M,且日益变差。G组、Z组、J组大鼠一般状况彼此之间相差不大,总体来看,处于逐渐好转的趋势。2.大鼠体重变化:在7天、14天、28天,与K组比较,各组大鼠体重均不同程度减小(P<0.01)。M组体重最小(P<0.01)。ZJ组体重与G组大鼠体重相当(P>0.05),且显著大于Z组和D组(P<0.01),Z组和D组相当(P>0.05)。3.大鼠肺组织外观形态观察:7d J组和水蛭素组变化与M组肉眼观无明显差别,肺组织出现轻度充血、水肿,存在散在瘀点,色泽不一致,弹性尚可。14d时水蛭素G组、ZJ组肺组织整体形态明显优于同期J组和水蛭素Z组、D组,同期的J组可见瘀点、瘀斑成片,局部组织实变,实变组织颜色变成暗红、弹性不佳,质地变韧。28d时水蛭素G组、ZJ组肺组织形态接近于K组,有散在的针尖大小的瘀点,肺组织轮廓饱满,弹性、质地尚可,J组、D组、Z组外观比同期M组稍好,但明显较同期的G组和ZJ组差。4.大鼠肺组织损伤评分与肺纤维化评分:7天、14天、28天与K组比较,各组大鼠肺组织纤维化评分均显著增高(P<0.01)。M组大鼠肺组织损伤评分和肺纤维化评分均最高(P<0.01),ZJ组评分均最低(P<0.01),与G组相当(P>0.05),且显著低于J组、Z组和D组(P>0.05),而J组明显低于Z组和D组(P<0.01),Z组与D组相当(P>0.05)。5.PAI-1基因和蛋白的表达结果:不同时间点,M组大鼠肺组织PAI-1基因和蛋白表达均最强(P<0.01),而且随着时间的推移表达强度逐渐增强,说明肺纤维化处于发展趋势,28天大鼠肺间质纤维化程度最重。各用药组进行比较发现:在7天、14天、28天,ZJ组大鼠肺组织PAI-1基因和蛋白表达均最弱(P<0.01),G组次之(P<0.01),J组表达仅次于G组(P<0.01),J组表达显著低于Z组和D组(P<0.01),而Z组和D组相当(P>0.05)。结论:水蛭素通过降低PAI-1基因和蛋白表达水平从而起到干预大鼠肺间质纤维化的作用并且水蛭素的治疗作用有明显的剂量依赖性。水蛭素联合激素治疗大鼠肺间质纤维化的疗效更佳,具有协同作用。更多还原