文献类型：学位论文

中文题名：当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的影响

作者：王宁[1];

第一作者：王宁

机构：[1]甘肃中医学院;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：李应东;甘肃中医学院

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：当归红芪;超滤膜提取物;人脐静脉内皮细胞;氧化损伤

年份：2008

摘要：目的：建立人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型，研究当归红芪超滤膜提取物对h2o2诱导人脐静脉内皮细胞ecv-304氧化损伤的影响，并初步探讨其作用机制。 方法：通过酶消化法对离体的人脐静脉内皮细胞系ecv-304细胞进行消化传代，建立过氧化氢(h2o2)诱导的ecv-304细胞氧化损伤模型。采用超滤技术对当归红芪合剂进行分离与纯化，以不同分子量、不同浓度的当归红芪超滤膜提取物作用于氧化损伤的ecv-304细胞，采用mtt法测定ecv-304细胞的活性及存活率，黄嘌呤氧化酶法检测细胞内超氧化物歧化酶(sod)活力，硫代巴比妥酸(tba)法检测细胞内丙二醛(mda)活力，考马斯亮兰法检测细胞内蛋白质的含量，流式细胞仪分析细胞周期及检测细胞内ca2+含量，rt.pcr检测细胞内at1 mrna的表达，观察当归红芪超滤膜提取物对h2o2诱导ecv-304细胞氧化损伤的影响。 结果：经0.5mmol/lh2o2刺激后细胞活性明显降低，sod活力明显降低，mda活力明显提高，g0/g1期细胞的数目明显增加，s期细胞的数目明显减少，细胞内ca2+含量明显增加(p<0.01)，at1mrna表达增加(p<0.05)；与h2o2组相比，当归红芪超滤膜提取物可以增强h2o2诱导ecv-304细胞氧化损伤的细胞活性，增加细胞的存活率且以作用72h为佳，提高氧化损伤的ecv-304细胞的sod活力，降低氧化损伤的ecv-304细胞的mda活力，促进氧化损伤的ecv-304细胞向s期转变，减少氧化损伤的ecv-304.细胞内ca2+含量，减少细胞内atlmrna表达(p<0.01，p<0.05)，且以5万分子量以下为佳。 结论：h2o2对离体培养的人脐静脉内皮细胞株ecv-304细胞有明显地致氧化损伤作用；当归红芪超滤膜提取物可有效抑制h2o2诱导的ecv-304细胞的氧化损伤，保护血管内皮细胞，且以5万分子量以下、高浓度、72h为佳；当归红芪超滤膜提取物对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用可能与其提高了抗氧化酶活性，降低了脂质过氧化物活性，促进了内皮细胞dna合成复制、蛋白质合成，减少了胞内ca2+的含量及减少了细胞内at1mrna的表达有关。