文献类型：学位论文

中文题名：基于“虚损生积”探讨益气消癥方治疗子宫肌瘤大鼠的作用机制

作者：司红红[1];

第一作者：司红红

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：王新斌;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：子宫肌瘤;免疫功能;益气消癥方

年份：2021

摘要：目的:　　通过观察益气消癥方对子宫肌瘤模型大鼠子宫病理学、T淋巴细胞亚群、血液流变学、肌瘤细胞的凋亡与周期分布、子宫组织内ER、PR及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的影响,探讨益气消癥方治疗子宫肌瘤的作用机制,进而为临床治疗子宫肌瘤提供新思路和理论基础.　　方法:　　1.50只SPF级Wistar雌性大鼠,适应性饲养1周后,随机分为空白组(K,8只)和造模组(42只).造模组腹腔注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/kg,1次/日+黄体酮注射液4mg/kg,1次/周,25天后,两种激素每日同用5天,剂量不变;空白组大鼠腹腔注射等体积生理盐水.造模成功后,将造模组大鼠随机分为模型组(M)、桂枝茯苓胶囊组(F)、益气消癥方高、中、低剂量组(G、Z、D).　　2.各组大鼠造模成功2天后,固定时间灌胃,每日一次,持续4周.实验过程中观察大鼠一般状态,并于造模前、造模后2、4周、药物干预后2、4周时称重.　　3.给药4周后,各组大鼠心脏采血,分别检测血液流变学和T淋巴细胞亚群水平.摘取子宫,测量子宫重量,计算子宫系数;取部分子宫组织固定于4%组织细胞固定液中,制作组织切片,分别用于HE染色和免疫荧光染色;部分组织于0.9%生理盐水中常温保存,2h内用流式细胞仪检测组织细胞的凋亡与周期分布情况;部分存于﹣80℃冰箱,Western-blot法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达水平.　　结果:　　1.一般状态:空白组大鼠实验全程未见异常.模型组大鼠在造模过程中逐渐出现食欲减退、毛色苍黄无光泽、脱毛、易惹激、相互撕咬等情况,个别大鼠出现乳房红肿、坏死.药物干预过程中,模型组大鼠上述症状逐渐加重;各治疗组大鼠较模型组精神状态好转,性情趋于平和,毛色渐有光泽,脱毛减轻,乳房红肿消退,且与给药时间、浓度呈正相关.　　2.体重及子宫系数:雌孕激素负荷后大鼠体重明显降低、子宫系数升高,差异显著(Plt;0.01);药物对恢复大鼠体重和子宫系数疗效明显(Plt;0.05).但桂枝茯苓胶囊与益气消癥方在升高大鼠体重、降低子宫系数上,作用相当,差异无统计学意义.　　3.子宫病理形态改变:光镜下空白组大鼠子宫平滑肌细胞形态正常,排列整齐,肌层未见增生及炎性细胞浸润;模型组子宫平滑肌明显增厚,肌组织排列紊乱,出现空泡,细胞大小不等,腺体增生活跃,增厚的肌层中有丰富的毛细血管及炎性细胞浸润;各治疗组子宫病理形态的改变介于空白组与模型组之间.　　4.血液流变学变化:子宫肌瘤模型大鼠的血黏度及红细胞压积均明显升高,差异有统计学意义(Plt;0.01).药物对改善大鼠血液流变学指标疗效显著(Plt;0.01);G组与Z、D组比较,效果更优,差异有统计学意义(Plt;0.05);G组与F组在改善大鼠血液流变学方面作用相当.　　5.免疫功能:模型组大鼠T细胞免疫特异性标志物CD3+,特别是CD4+水平明显降低,而CD8+水平明显高于正常,差异有统计学意义(Plt;0.01).各治疗组均能明显改善大鼠的免疫功能,可有效调节T细胞亚群变化,与模型组相比,差异有显著性(Plt;0.05);且益气消癥方高剂量组效果更优.　　6.子宫组织中雌、孕激素受体表达的变化:子宫肌瘤大鼠靶器官内ER、PR呈高表达,与空白组差异显著(Plt;0.05);各治疗组中,G组抑制ER、PR表达更显著,差异具有显著性(Plt;0.05),而D组作用不明显.　　7.肌瘤细胞凋亡与周期的变化:与模型组相比,各治疗组大鼠肌瘤组织细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(Plt;0.01),但G组促凋亡效果更显著(Plt;0.05).桂枝茯苓胶囊和益气消癥方均能抑制细胞从静息期进入活跃期,明显调节了处于G1/0期和S、G2M期的细胞比例,差异有统计学意义(Plt;0.05),且G组较其他各组更能明显阻滞肌瘤组织细胞周期.　　8.子宫组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达:模型组大鼠子宫组织中Bcl-2蛋白呈高表达,而Bax、Caspase-3蛋白与之相反(Plt;0.01).各治疗组对Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平均有所改善,但益气消癥方的调控作用优于桂枝茯苓胶囊(Plt;0.05).　　结论:　　1.益气消癥方能够改善子宫肌瘤大鼠的一般生存状况.　　2.益气消癥方能够改善子宫肌瘤大鼠的子宫病理状态.　　3.益气消癥方可以调节机体免疫功能,促进血液循环,降低子宫组织内高雌孕激素水平,抑制靶细胞对性激素的反应性,阻滞细胞周期,促进子宫平滑肌细胞的凋亡,维持平滑肌细胞增殖和凋亡的动态平衡,这可能是其治疗子宫肌瘤的机制之一.