文献类型：科技成果

中文题名：p38MAPK-MSK1/2-CREB信号通路关键分子在EMT痛经大鼠宫腔微环境中的响应及少腹逐瘀汤可能干预作用

完成人：武权生[1];崔宇红[1];张小花[1];舍雅丽[1];樊景春[1];李佳蔚[1];杨永琴[1];董娟娟[1];赵琴琴[1];

第一作者：武权生

完成机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

年份：2024

语种：中文

中文关键词：子宫内膜异位症;少腹逐瘀汤;中医药治疗

摘要：子宫内膜异位症(Endometriosis，EMT)是一种妇科常见病，在育龄期妇女中发病率高达10%～15%，临床并发症主要为频发周期性痛经、渐进性盆腔粘连及不孕，严重影响育龄妇女生活质量和生育机能;新近资料EMT伴发痛经高达60%～80%，且发病率逐渐呈显著增高趋势。近年来应用中医药治疗EMT痛经积累了丰富的经验，且通过实验研究证实了中医药治疗EMT痛经具有确切疗效，值得深入研究并推广应用。尤其是近年来随着EMT人群检出率年轻化和发病率逐年增高的趋势，激素类药物治疗EMT痛经副作用大，易造成严重的内分泌失调，而手术治疗存在容易复发和部分患者治疗无效的问题，因此研发治疗EMT痛经安全有效的中药复方制剂，已成为近年来中医界重点关注的研究方向，也是维护妇女健康的重要措施之一。由于EMT痛经病位多在子宫及冲任二脉，中医病机多责之于寒瘀两因素导致不通则痛或不荣则痛两端;尤其是在西北地区，地势海拔较高，气候寒冷，临床中EMT痛经患者体质特点多以寒凝血瘀为主，故该课题组常选用具有温经散寒、化瘀止痛的复方(如少腹逐瘀汤及其加减方等)加减治疗，疗效显著。该项目结合子宫内膜异位症(EMT)痛经临床以西北寒冷气候易致妇女出现寒凝血瘀病机特点，以EMT痛经脏腑病证理论和现代医学分子生物学相结合，提出基于“寒瘀交阻”致痛理论，结合前期工作建立“p38MAPK-MSK1/2-CREB信号通路关键分子在EMT痛经大鼠宫腔微环境中的交互响应及少腹逐瘀汤可能干预作用”科学工作假说，以寒凝血瘀型EMT痛经模型大鼠为研究对象，采用免疫组化、qPCR和免疫印迹技术检测p38MAPK-MSK1/2-CREB信号通路关键分子基因蛋白及其磷酸化在EMT痛经宫腔微环境中的动态表达规律，在此基础上进一步观察该通路分子与疼痛介质以及炎性因子等之间的级联激发效应，并应用少腹逐瘀汤进行干预后，通过相关性分析，拟p38MAPK-MSK1/2-CREB信号通路关键分子角度揭示EMT痛经发生机制以及少腹逐瘀汤对其干预的科学内涵。研究结果：1.p38MAPK-MSK1/2-CREB通路在寒凝血瘀型EMT痛经模型大鼠子宫微环境中的动态表达：(1)寒凝血瘀型EMT痛经大鼠模型的建立与评估：寒凝血瘀EMT痛经模型大鼠一般生存状态较差，EMT痛经表现明显，组间差异具有统计学意义;EMT痛经组随造模时间的延长，移植物体积逐渐增大。EMT痛经模型组子宫组织[Ca²⁺]i显著升高。(2)EMT痛经模型组在位内膜p38MAPK、CREB、NGF、BDNF表达水平逐渐升高;p-p38MAPK、p-CREB、NKA、SP表达，IL-lβ、TNF-α、IL-6、IL-8、NO的含量呈现阶段性升高;MSK1/2表达逐渐降低，差异具有统计学意义。提示在寒凝血瘀型EMT痛经模型大鼠宫腔微环境中，疼痛敏化及炎症因子存在随造模时间延长逐渐增多的趋势。2.少腹逐瘀汤通过p38MAPK-MSK1/2-CREB通路干预寒凝血瘀EMT痛经大鼠的效应及分子机制：EMT痛经模型大鼠给予低、中、高浓度少腹逐瘀汤和阳性对照药物孕三烯酮干预后，各治疗组大鼠宏观证候积分改善，少腹逐瘀汤高剂量组恢复较快;EMT痛经表现改善;异位病灶体积缩小，组间差异均具有统计学意义;子宫组织中[Ca²⁺]i显著降低，p38MAPK、CREB、NGF、BDNF表达下降;p-p38MAPK、pCREB、NKA、SP表达，IL-lβ、TNF-α、IL-6、IL-8、NO含量的水平均下降，以少腹逐瘀汤高剂量组明显，差异具有统计学意义，中药高、中剂量组及对照组子宫MSK1/2蛋白及在位子宫内膜组织中MSK1/2mRNA表达明显升高。提示在寒凝血瘀型EMT痛经大鼠的宫腔微环境中，少腹逐瘀汤通过改变p38MAPK-MSK1/2-CREB通路中的炎症因子、疼痛敏化因子基因、蛋白及其磷酸化水平，改善了寒凝血瘀型EMT痛经疼痛，发挥了抑制宫腔微环境炎性状态和疼痛敏化进展的作用。该课题为温阳活血类复方中药基于临床疗效深入研究相关中医复方干预EMT痛经的作用机制，并为筛选防治EMT痛经优势中成药的关键技术提供理论支撑。该课题在临床应用中，灵活运用温阳活血方药加减，以温阳活血续贯疗法联合脏腑背腧排罐疗法或温肾化瘀序贯疗法联合三伏隔姜灸为西北地区女性治疗寒凝血瘀型EMT痛经，切实改善了面对严重影响生活质量并难以根治的EMT痛经患者的痛苦和心理恐惧。该课题通过实验、临床观察从理论上探讨EMT痛经发生机制及其有效干预措施，为广大患者提供了更多简便验廉的中医药治疗方法，从根本上减轻了患者EMT痛经症状，在改善女性在生活质量，提升女性工作效率，降低手术率极其并发症，促进该省中医药事业发展等社会经济效益中的意义重大且已初显成效。现代女性生活节奏较快，工作、家庭负担较重，迫使有些患者未能更好的规律治疗，在后续的研究及临床治疗中有待进一步宣传中医药治疗EMT痛经的明确机理和疗效，和运用中医药方法对患者生活保健的指导，帮助患者树立中医药治疗的自信和战胜EMT痛经的信心，让中医药更好地维护女性健康，用科研、技术与服务为该省女性全生命周期健康护航。