文献类型：学位论文

中文题名：红景天苷对模拟高海拔缺氧条件下心肌自噬相关通路AMPK的影响

作者：杜丽[1];

第一作者：杜丽

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：王楠;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：心脏损伤;红景天苷;实验药理;AMPK信号通路;高海拔缺氧条件

年份：2020

摘要：目的：　　观察模拟高海拔缺氧条件下大鼠的体重、血气指标、心脏组织病理形态，心肌细胞凋亡、AMPK信号通路及自噬相关蛋白表达的变化情况。探讨红景天苷保护高海拔缺氧引起的大鼠心脏损伤可能的分子药理机制。　　方法：　　本实验将40只6~8周龄的Wistar雄性大鼠按照随机数字表法分为空白对照组（兰州当地海拔1500m）和缺氧组（模拟海拔6500m），缺氧组又分为生理盐水组、红景天苷组、Compound C组、Compound C+红景天苷组。按实验设计将大鼠称重后空白对照组饲养于中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院动物实验科，期间自由进食和饮水。缺氧组按组别置于模拟海拔6500m环境的大型低压氧舱中，每日给予生理盐水（10ml/kg）灌胃、红景天苷（40mg/kg）灌胃、Compound C(20mg/kg)腹腔注射。实验期间记录大鼠死亡数，实验结束时再次测量体重。将大鼠麻醉后暴露腹主动脉抽取动脉血进行血气指标检测;解剖分离并摘取心脏，行苏木精–伊红染色(Hematoxylin-eosin staining，HE)后用显微镜观察心肌细胞及心肌纤维的变化;荧光原位末端标记（TUNEL）染色法检测心肌细胞凋亡;蛋白质免疫印迹（Western blot）检测心肌自噬通路相关蛋白AMPK、P-AMPK、mTOR、P-mTOR及自噬蛋白Beclin-1的表达。　　结果：　　1.暴露于缺氧环境中的生理盐水组、Compound C组和红景天苷+Compound C组大鼠的体重与缺氧前相比均有所降低，其中缺氧生理盐水组及Compound C组体重降低具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01），但红景天苷组体重反而有所增加，而且红景天苷+Compound C组体重降低也不是很明显，与缺氧前相比差异无统计学意义（P＞0.05）。　　2.暴露于缺氧环境中的各组大鼠血气指标pH、PaO2、SaO2水平较常氧组相比均降低（P＜0.01）;而PaCO2、Hb、HCT、Lac水平与常氧组相比均升高（P＜0.01）;其中Compound C组各项指标变化更加显著，但给予了红景天苷的两组各项指标均有所好转。　　3.暴露于缺氧环境中的各组大鼠心肌组织也均有不同程度的损伤，出现了心肌细胞及心肌间质水肿、结构紊乱、细胞界限不清等病理变化，同时各组大鼠心肌细胞凋亡数量与心肌病理损伤程度一致。但是给予红景天苷治疗后心肌细胞病理形态、心肌细胞凋亡程度均有所改善。　　4.暴露于缺氧环境中的各组大鼠心肌自噬通路蛋白AMPK、P-AMPK的表达水平上升，mTOR、P-mTOR的表达水平降低。给予红景天苷后AMPK、P-AMPK表达进一步增加，mTOR、P-mTOR的表达进一步降低;给予Compound C后各蛋白的表达与红景天苷组呈相反趋势;而同时给予了Compound C和红景天苷组AMPK、P-AMPK表达量的增加和mTOR、P-mTOR表达量的降低介于Compound C组与红景天苷组之间，但是自噬蛋白Beclin-1的表达较Compound C组增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。　　结论：　　1.模拟高海拔缺氧条件下大鼠体重降低、心肌细胞发生病理性损伤、凋亡心肌细胞显著增加。　　2.红景天苷可以正向调节AMPK信号通路，激活自噬，对缺氧损伤的大鼠心肌起保护作用。