文献类型：学位论文

中文题名：马铃薯外敷药膏对膝关节创伤性滑膜炎兔关节液中IL-1β、TNF-ɑ及血清中SOD、MDA影响机制的研究

作者：刘晓[1];

第一作者：刘晓

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：吴建民;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：膝关节创伤性滑膜炎;马铃薯外敷药膏;作用机制;促炎性因子

年份：2016

摘要：目的：　　通过观察“马铃薯外敷药膏”（甘肃中医药大学附属医院推拿康复科自拟方，组方为：马铃薯+冰片+明矾）对膝关节创伤性滑膜炎模型兔滑膜的结构变化及血清中SOD、MDA和关节液中IL-1β、TNF-ɑ的影响，探讨中药“马铃薯外敷药膏”对膝关节创伤性滑膜炎干预的疗效。　　方法：　　实验动物选用新西兰大白兔40只，雌雄各半，3-4月龄，体重2.2-2.8kg，首先将其随机分为2组：A空白组（10只）、另一组为B造模组，造模成功后再将B造模组分为3组，分别为：C模型对照组（只造模不作任何治疗），D扶他林乳胶剂对照组（模型制作成功后外敷扶他林乳胶剂干预5天）、E马铃薯外敷药膏组（模型制作成功后外敷马铃薯外敷药膏干预5天），每组10只新西兰大白兔，单一使用右侧膝关节，共40个关节。适应性喂养一周后，将新西兰大白兔固定，用8％的硫化钠褪去右侧后肢膝关节周围的毛，用3%戊巴比妥钠按lml/kg由耳缘静脉缓慢推注麻醉（时间严格控制在不低于2min），用针灸针垂直刺入各组新西兰大白兔右侧后肢股四头肌和腓肠肌中点，连接“英迪”KWD一808一 I型脉冲针灸治疗仪，通电，使用连续波波形，频率始终保持为50Hz，强度固定在6.0mv(适宜造模动物的耐受强度，根据预实验的测定：若强度小于6.0mv，兔膝关节的屈伸幅度不大，不能达到模型建立的强度;若强度大于6.0mv易导致免肌肉痉挛,使关节处于强直状态，从而影响模型建立），使造模动物膝关节不停地被动屈伸造成膝关节滑膜的损伤，每天2次，每次45min，连续进行10天，建立动物模型。造模开始后每天大体观察测定兔造模肢膝关节周径的变化、关节表面温度等情况。制作马铃薯外敷药膏(甘肃中医药大学附属医院推拿康复科自拟方)：将马铃薯洗净，捣成泥，按一定比例均匀的撒上明矾和冰片（具体比例为：马铃薯：明矾：冰片=100:4:1），冷藏保存（制作一次马铃薯外敷药膏最多为两天用药量）;动物给药：模型建立后，D扶他林乳胶剂对照组造模膝关节外敷扶他林乳胶剂干预，按约4mm厚度均匀覆盖造模关节表面，每天2次，敷药干预治疗5天。将马铃薯外敷药膏外敷E马铃薯外敷药膏组受试兔膝关节损伤局部，每天敷药2次，连续进行治疗5天;敷药完成之后，将新西兰大白兔股动脉取血，离心取上清液（离心操作条件具体为：3500r/min，10min），并把离心所得血清置于-20℃冷冻保存待用;新西兰大白兔的处死采用空气栓塞法，处死后用手术刀打开受试兔右膝关节囊，经过大体的观察记录后，用lml生理盐水灌洗关节腔，严格小心的收集关节液，置于已硅化试管中，离心(离心操作条件具体为：4℃，1800r，10min),将上清液置于-70℃冷藏保存待用。取受试膝关节滑膜标本，并放置于4%多聚甲醛中固定待用。制作常规病理切片，将滑膜进行HE染色，观察滑膜的结构变化。结果检测采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子（TNF-ɑ）、采用黄嘌呤氧化酶法（盐酸羟胺法）检测超氧化物歧化酶（SOD）含量、采用硫代巴比妥(TBA)法检测丙二醛（MDA）的含量。对实验数据采用spss18.0软件进行统计分析。　　结果：　　1.造模后，膝关节创伤性滑膜炎模型组大白兔一般情况与空白组对比，膝关节有明显肿胀、滑膜明显增厚、关节表面温度升高。（P<0.01）。　　2.检测后发现，造模大白兔与正常大白兔相比，TNF-α、IL-1β及MDA含量明显升高，SOD活性明显降低（P<0.01）;治疗后，马铃薯外敷药膏组大白兔关节液和血清中TNF-α、IL-1β及MDA的含量明显低于模型组，SOD含量高于模型组（P<0.01），但马铃薯外敷药膏组与扶他林乳胶剂对照组进行比较分析，差异无统计学意义（P>0.05）。　　结论：　　1.兔膝关节创伤性滑膜炎模型建立成功后，滑液中的促炎细胞因子TNF-α、IL-1β及血清中的SOD、MDA均有明显变化，说明膝关节创伤性滑膜炎的发病于促炎细胞因子密切相关。　　2.马铃薯外敷药膏能有效抑制促炎性因子TNF-α、IL-1β、MDA的表达，提升SOD的活性，在分子水平上揭示了马铃薯外敷药膏对于膝关节创伤性滑膜炎的疗效。