文献类型：期刊文献

中文题名：不同条件下骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性研究

作者：范萍[1];刘永琦[1];吴晓晶[1];董介正[1];颜春鲁[1];张毅[1];苏菊萍[1]

第一作者：范萍

机构：[1]甘肃中医学院中西医结合基础免疫学教研室,甘肃兰州730000

第一机构：甘肃中医药大学基础医学院（敦煌医学研究所）|甘肃中医药大学中西医结合学院

年份：2010

卷号：26

期号：4

起止页码：322

中文期刊名：细胞与分子免疫学杂志

外文期刊名：Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

收录：CSTPCD;;Scopus;北大核心:【北大核心2008】；CSCD:【CSCD2011_2012】；PubMed;

基金：国家中医药管理局基金资助项目(04-05JQ05);甘肃省教育厅基金资助项目(034B-02)

语种：中文

中文关键词：骨髓间充质干细胞;培养季节;生物学特性

摘要：目的:探讨并优化大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养的方法,筛选出最佳培养时间,并鉴定其生物学特性,为BMSCs的应用奠定基础。方法:在不同季节,采用贴壁筛选法分离纯化BMSCs,并通过传代培养对其进行扩增。倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长特征,并按时间段绘制细胞生长曲线。流式细胞术检测BMSCs抗原分子CD90及造血干细胞抗原分子CD45的表达;用β-巯基乙醇诱导BMSCs分化。结果:生长曲线分析,冬季培养的BMSCsF3代潜伏期为4d,对数期为5～9d,第10天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象;春、夏、秋三季培养的BMSCsF3代潜伏期为2d,对数增殖期为3～6d,第7天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象。流式细胞术检测F0代细胞中,CD90+CD45-细胞为3.5%,F3代细胞中CD90+CD45-细胞达到97%;F3代BMSCs镜下呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长。β-巯基乙醇诱导BMSCs5h后表现出明显的神经元样细胞形态。结论:不同培养季节对BMSCs生长曲线影响明显,春夏秋三季细胞生长较快,而冬季细胞生长缓慢,体现了"春生、夏长、秋收、冬藏"的生物规律;贴壁筛选法是理想的体外分离扩增BMSCs的培养体系,所培养的BMSCs纯度高、生物学性状稳定。