文献类型：科技成果

中文题名：ERβmRNA在POF大鼠下丘脑-垂体-卵巢表达的差异以及左归丸的干预作用

完成人：赵粉琴[1];谢知慧[1];杨永琴[1];程芳[1];袁爱倩[1];徐世倩[1];李春瑶[1];刘小莉[1];李娜娜[1];

第一作者：赵粉琴

完成机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

年份：2024

语种：中文

中文关键词：左归丸;卵巢功能衰退;中药复方

摘要：1.任务来源：该课题为2019年甘肃省中医药管理局项目，项目编号：GZK-2019-28。研究经费2.4万元，起始时间2019年6月，结题时间2022年2月。2.技术原理和性能指标：技术原理：生理性或者医源性卵巢功能衰退(POF)主要是卵泡数量减少，雌激素水平下降，出现一系列近期和远期并发症，严重影响女性生殖、生命健康。女性生殖和内分泌功能由下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的正负反馈调控，垂体分泌促卵泡生成素(FSH)和黄体生成素(LH)，优先激活它们在下丘脑-垂体-卵巢-子宫性腺轴中的同源受体发挥重要作用，促进卵泡发育、成熟以及排卵，同时卵泡发育合成的雌激素(E2)，与其富含雌激素受体(ER)的下丘脑、垂体、卵巢和子宫组织结合发挥作用。所有激素在体内生理作用的强弱，除了与生物效应量呈正比，还受激素受体(R)活性度高低的影响。促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)对卵巢卵泡的发育、成熟以及排卵起有重要调控作用，而且不受外源性雌激素含量的影响。所以研究卵巢功能早衰(POF)下丘脑-垂体-卵巢性腺轴上FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)以及雌激素受体(ER)含量变化就显得尤为重要。性能指标：①采用顺铂腹腔注射造成POF模型，青年、早衰、老年大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织的FSHR、LHR和ER受体表达量的变化，明确FSHR、LHR和ER受体在不同年龄段大鼠下丘脑-垂体-性腺轴上性腺组织器官上的表达量差异。②用不同剂量左归丸干预POF(卵巢功能衰退和老年)大鼠，检测血清性激素水平，下丘脑、垂体和卵巢组织的FSHR、LHR和ER受体表达量，明确左归丸方治疗POF作用机制。3.技术的创造性、先进性：基于肾主生殖理论，用免疫组化法定位和蛋白印迹法对比青年、早衰、老年大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织的FSHR、LHR和ER受体表达量的变化，明确FSHR、LHR和ER在不同年龄段大鼠在下丘脑-垂体-性腺轴上的表达量差异;用不同剂量左归丸干预POF(卵巢功能衰退和老年)大鼠，检测血清性激素水平，下丘脑、垂体和卵巢组织的FSHR、LHR和ER受体表达量的相关性;探讨左归丸防治卵巢功能衰退的作用机理，是通过上调HPO性腺轴各部位激素受体水平，调控大鼠HPO性腺轴达到治疗POF的目的。4.技术成熟程度，适用范围和安全性：使用的雌激素替代疗法以缓解雌激素缺乏造成的各种绝经后症状，这是治疗生理性和病理性卵巢功能衰退的主要方法，但长期应用雌激素的副作用有乳腺癌、子宫内膜癌、心脑血管病及血栓栓塞性疾病等。左归丸经典补肾填精、通脑益髓功效，在促进卵泡发育形成，促进下丘脑-垂体-卵巢性腺轴功能恢复方法已经有研究，而且临床疗效肯定，大多数研究集中在卵巢颗粒细胞和卵泡增值方面，对HPO轴激素FSH、LH和E2血清含量研究较多，但对其在下丘脑、垂体和卵巢组织相应效应器官含量研究较少，而激素和受体结合才能发挥相应的作用，该研究集中在受体含量研究，尤其是左归丸对早衰和老年大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织相应器官FSH、LH和E2受体水平研究，有很重要临床价值。左归丸适用于各种原因导致的卵巢功能下降引起的各种临床综合征，研究其作用机制，更好的为其在临床应用提供;理论依据。市售药品已经很普及，口服使用方便，疗效显著，适合各类医院、社区门诊普遍使用。5.应用情况及存在问题：中医药防治卵巢功能早衰的研究很多，其作用机制可能与其调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能、改善机体神经-内分泌-免疫网络功能及中药复方整体调节机体内环境等因素有关。左归丸对卵巢衰退调节作用不仅仅局限于补肾，可能是通过整体调节、使用安全、没有毒副作用、费用相对低等，有着良好的发展前景。该实验采用动物化疗损伤导致卵巢早衰模型，虽然化疗药造模和临床的肝肾阴虚证类似，但可能由于时间短，个别卵巢内卵泡没有完全闭锁和临床卵巢功能减退有一定的差别。用免疫组化法定位和蛋白印迹法对比青年、早衰、老年大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织的FSHR、LHR和ER受体表达量的变化，同时由于经费问题，该实验所选实验样本数量少，观察时间短，也影响对其疗效的进一步判断。探讨左归丸对卵巢衰退的疗效及治疗机制，未能深入研究其更广泛的治疗作用和准确的量效、时效关系，这些还需今后深入的实验研究来补充和完善。同时实验研究仅限于下丘脑-垂体-性腺轴上受体表达，有待于以后通过电镜观察下丘脑、垂体和卵巢组织内线粒体和细胞结构变化，更进一步明确左归丸作用的靶点，为左归丸临床应用于与卵巢功能减退的其综合征的治疗提供充分的理论依据。6.历年获奖：2020年，2021年皇甫谧科学技术二等奖各1项。