文献类型：学位论文

中文题名：敦煌古方大补脾汤对顺铂致小鼠肝肾毒性的保护作用研究

作者：王碧莹[1];

第一作者：王碧莹

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：张小平;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：大补脾汤;顺铂毒性;肝肾组织;实验药理

年份：2020

摘要：目的：顺铂作为常用的化疗药物，在治疗前列腺癌、肺癌、乳腺癌、食道癌等多种实体肿瘤方面均有较好的临床疗效。但是在化疗的过程中，经常出现恶心呕吐、耳鸣、心动过速、肾毒性、肝毒性等不良反应，影响肿瘤患者的治疗效果或者留下后遗症。从中医学角度分析，顺铂毒性容易耗气伤阴，导致机体元气大衰，形成脾湿中阻、肾阴亏虚的证候，而敦煌古方大补脾汤具有大补元气、滋肾健脾的功效。按照辨证与论治相一致的原则，本研究选用敦煌古方大补脾汤进行干预治疗，探讨其对顺铂所造成的不良反应是否具有一定的改善作用。　　方法：60只昆明小鼠随机分为（1）生理盐水组：等体积的生理盐水灌胃;（2）模型组：小鼠腹腔注射顺铂注射液（2mg/kg体质量/次），每3d一次，共注射6次;（3）顺铂+高剂量中药组;（4）顺铂+中剂量中药组;（5）顺铂+低剂量中药组;以上三组注射顺铂期间用中药灌胃进行干预，每次剂量分别为0.7mL、0.5mL、0.25mL，每天两次，早晚各一次。（6）单独中药组：每次大补脾汤灌胃0.5mL，每天两次。治疗30d后，观察小鼠的一般情况;计算各组小鼠的体质量、肾脏系数和肝脏系数;检测小鼠肾功能相关生化指标：肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）;检测小鼠肝功能相关生化指标：丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和总胆红素（TRIL）;HE染色切片观察小鼠肾脏组织和肝脏组织的病理变化;应用实时荧光定量PCR（RT-PCR）方法检测小鼠肾脏组织TNF-α的mRNA表达水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中TNF-α的含量。　　结果：（1）模型组的小鼠饮食饮水量逐天下降，精神不振，体质量明显减轻，并且出现大便稀溏，体表温度较低，而经过中药干预后，小鼠饮食饮水量上升，精神状态、体质量和大便状态等显著变好。（2）模型组小鼠的体质量、肾脏系数和肝脏系数分别为30.0±1.41g、0.0109±0.10%和0.0325±0.10%，与之相比，顺铂+高剂量组的体质量、肾脏系数和肝脏系数分别为38.3±0.91g、0.0113±0.11%和0.0332±0.14%，相关指标明显改善（P＜0.01）。（3）肾功能相关生化指标：Scr在生理盐水组、模型组、中药高中低剂量组的含量分别为134.00±9.31μmol/L、186.00±12.44μmol/L、146.00±8.12μmol/L、159.00±12.32μmol/L和191.00±8.76μmol/L，和模型组比较，顺铂+高剂量中药组与中剂量中药组均有所降低（P＜0.01）;以上各组的BUN含量分别为4.79±7.64mmol/L、5.71±7.47mmol/L、3.43±5.15mmol/L、4.83±6.37mmol/L、5.38±5.89mmol/L，相比模型组，高剂量组与中剂量组含量明显降低（P＜0.01）。（4）肝功能相关生化指标：模型组ALT含量（144±10.29U/L）与生理盐水组（89±7.48U/L）比较明显升高（P＜0.01），中药高剂量组（91±13.84U/L）与模型组相比显著降低（P＜0.01），中剂量组（105±9.39U/L）也有一定程度的降低（P＜0.05）;AST含量在生理盐水组、模型组、中药高中低剂量组分别为114±10.37U/L、201±14.61U/L、87±13.89U/L、137±13.18U/L、193±15.48U/L，和模型组比较，中药高剂量组和中剂量组均出现降低;模型组TRIL含量为17.35±6.35μmol/L，中药高、中剂量组的TRIL含量（13.59±4.77μmol/L和13.85±6.82μmol/L）与模型组相比出现下降（P＜0.01）。（5）观察病理切片：模型组肾小球内毛细血管增生，肾间质有炎症浸润，肝细胞肿胀明显，细胞浆内有空泡形成，中央静脉淤血，经过中药干预，各组小鼠的肾组织和肝组织病变程度均有不同程度的改善。（6）模型组小鼠TNF-α的mRNA表达水平大约为生理盐水组的64倍，含量明显上升（P＜0.01）。而顺铂+高剂量中药组TNF-α的mRNA的表达含量大约是模型组的1/3水平，含量明显下降（P＜0.01），中、低剂量组小鼠TNF-α的mRNA的表达含量与模型组比较无明显差异（P＞0.05）。（7）生理盐水组小鼠的血清TNF-α含量为3.57ng/L，模型组小鼠的血清TNF-α含量为15.33ng/L，明显上升（P＜0.01）。与模型组相比，顺铂+高剂量中药组的小鼠血清TNF-α含量为12.65ng/L，指标明显下降（P＜0.01），而中、低剂量中药组的小鼠血清TNF-α含量没有显著统计学差异（P＞0.05）。　　结论：（1）经过敦煌古方大补脾汤的干预治疗，小鼠肾功能相关生化指标肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）的含量明显降低，肾脏组织病变程度有所改善，炎症因子TNF-α的mRNA表达水平和血清中含量明显下调，抑制了肾脏的炎症，证明大补脾汤可以一定程度的保护肾脏免受顺铂毒性的损害。　　（2）经过敦煌古方大补脾汤的干预治疗，小鼠肝功能相关生化指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和总胆红素（TRIL）的含量明显下降，肝脏组织的病变程度得到改善，证明此方也能降低顺铂对肝脏的损伤。　　（3）选用大补脾汤进行干预治疗后，肾脏和肝脏毒性相关指标均有明显的改善，证明大补脾汤可能在减轻顺铂毒性方面有一定的临床应用价值。