文献类型：学位论文

中文题名：疏肝健脾法对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织IL-6、IL-6R表达的影响及其机制研究

作者：李婷[1];

第一作者：李婷

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：朱向东;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：溃疡性结肠炎;疏肝健脾法;白介素-6受体;肠粘膜;实验药理

年份：2017

摘要：目的：本课题以TNBS/乙醇溶液灌肠+束缚应激+饮食失节大鼠肝郁脾虚型UC为切入点，基于中医“整体观”与“形神一体”理论，观察痛泻要方对UC模型大鼠结肠组织中细胞因子IL-6、IL-6R蛋白的影响，并与前期研究结果相佐证，阐释痛泻要方通过调控大脑中IL-6/IL-6R的信号通路，进而降低IL-6、IL-6R蛋白在局部肠粘膜的表达，达到治疗UC的目的，这可能是痛泻要方治疗UC模型大鼠的生物学机制之一，为临床上应用该方治疗溃疡性结肠炎提供实验室依据。　　方法：将SPF级Wistar大鼠进行为期一周的适应性喂养，适应性饲养一周后，随机挑选15只作为空白组，其余大鼠进行不定时束缚（6h?d-1）并隔日给食，持续一周后禁食48h，然后采用2、4、6-三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇溶液（100mg·kg-1TNBS+50％乙醇溶液0.25mL）复制UC的模型，模型成功后，再随机分为模型组、美沙拉嗪组、痛泻要方低、中、高剂量组，空白组给予等体积生理盐水灌肠。空白组大鼠正常饲养，其余各组大鼠继续进行不定时束缚（6h?d-1）并隔日给食，2周后模型成功。开始给药：造模后第1天各组大鼠按照10mL?kg-1的体积进行灌胃，其中痛泻要方低、中、高剂量组分别给予生药2.75，5.5，11g?kg-1?d-1剂量灌胃，美沙拉嗪组给予0.5g?kg-1?d-1剂量灌胃，空白组、模型组给予0.9%生理盐水进行灌胃，1次?d-1，连续21天后处死，取大鼠病变结肠组织，肉眼观察记录大鼠结肠形态及结肠损伤情况，并分别选用免疫组化、蛋白质印迹和激光共聚焦法检测各组大鼠结肠组织中的IL-6和IL-6R的蛋白定位、半定量及共表达。　　结果：　　1.SP法检测结果与空白组比较，模型组大鼠结肠组织中IL-6、IL-6R平均光密度（OD）值均显著升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组比较，其余各治疗组大鼠结肠组织中IL-6、IL-6R平均光密度（OD）值明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。　　2.Western Blot法检测结果与空白组相比，模型组大鼠结肠组织中IL-6、IL-6R蛋白表达明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比，其余各治疗组大鼠结肠组织中IL-6、IL-6R蛋白表达明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。　　3.激光共聚焦免疫双标法检测结果与空白组相比，模型组大鼠结肠组织中IL-6、IL-6R蛋白表达显著升高，差异具有统计学意义（P＜0.01）;与模型组相比，美沙拉嗪组和痛泻要方中、高剂量组大鼠结肠组织中IL-6、IL-6R蛋白表达明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.01）,低剂量组降低不明显(P＞0.05)。　　结论：　　1.溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中炎症因子IL-6、IL-6R较高，说明溃疡性结肠大鼠的肠粘膜呈炎症反应的病理状态，而痛泻要方能降低UC模型大鼠结肠组织中炎症因子IL-6、IL-6R蛋白的表达含量，说明痛泻要方具有抑制炎症反应，恢复免疫稳态，治疗UC的作用。　　2.较高剂量的痛泻要方降低溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子IL-6、IL-6R表达的效能较低剂量高，说明痛泻要方的作用随着治疗剂量的提高而升高，且高剂量痛泻要方降低IL-6、IL-6R蛋白表达的作用与美沙拉嗪基本一致，说明痛泻要方具有与美沙拉嗪相当的治疗效果。