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温肾健脾法对溃疡性结肠炎模型大鼠血清IL-8、结肠组织NF-κBp65、IL-1βmRNA表达影响的研究
文献类型:学位论文
中文题名:温肾健脾法对溃疡性结肠炎模型大鼠血清IL-8、结肠组织NF-κBp65、IL-1βmRNA表达影响的研究
作者:荀敏奇[1];
第一作者:荀敏奇
机构:[1]甘肃中医学院;
第一机构:甘肃中医药大学
导师:李兰珍;甘肃中医学院
授予学位:硕士
语种:中文
中文关键词:UC;温肾健脾法;脾肾阳虚型;IL-8;NF-κBp65;IL-1β
年份:2014
摘要:目的 1、阐明脾肾阳虚证型是UC的重要证型,温肾健脾法及其代表方四神丸是治疗复发型、难治型UC的重要治法、方药。 2、初步阐释温肾健脾法及其代表方四神丸调控UC模型大鼠肠黏膜修复的作用机制,为用温肾健脾法治疗UC提供科学依据。 方法 采用“病—证结合”的方法(番泻叶浸液灌胃+糖皮质激素腹腔注射+TNBS/乙醇混悬液灌肠)制备脾肾阳虚证UC模型大鼠。之后采用高、中、低三种不同剂量的四神丸进行干预治疗21天,同时以SASP作为阳性对照药物进行治疗。取材后,采用病理学方法(肉眼观察结肠组织大体形态并评分、HE染色镜下观察肠黏膜损伤及修复情况)观察大鼠结肠组织修复情况、ELISA法检测大鼠血清IL-8、SP法和qRT-PCR法分别检测大鼠结肠组织中NF-κBp65、IL-1β的表达。 结果 1、ELISA法检测大鼠血清IL-8表达:与空白组比较,模型组大鼠血清IL-8含量显著增高(P<0.01);治疗后,与模型组比较,对照组、四神丸低、中、高剂量组大鼠血清IL-8含量均显著降低(P<0.01)。 2、SP法检测大鼠结肠组织NF-κBp65表达:(1)镜下可见:空白组NF-κBp65阳性细胞呈阴性表达,模型组NF-κB65阳性细胞呈胞浆阳性,阳性细胞为单核-巨噬细胞,散在浸润于黏膜下层、淋巴滤泡内及外膜层,呈中等强度至强阳性表达。其余各治疗组大鼠NF-κB65阳性细胞均成呈弱度至中等强度表达。(2)NF-κB65阳性细胞平均灰度值结果显示:与空白组比较,模型组NF-κB65表达显著增强(P<0.01);治疗后,与模型组比较,对照组、四神丸中、高剂量组NF-κB65表达显著减弱(P<0.01)。 3、RT-qPCR法检测大鼠结肠组织IL-1β mRNA表达:与空白组比较,模型组IL-1βmRNA表达显著增强(P<0.01);治疗后,与模型组比较,对照组、四神丸中、高剂量组IL-1β mRNA表达显著减弱(P<0.05)。 结论 1、四神丸降低了UC模型大鼠血清中IL-8的表达,抑制了导致机体炎症反应的活性产物的释放,从而减弱了机体炎症反应。 2、四神丸降低了UC模型大鼠结肠组织中NF-κBp65的表达,终止了相关炎症反应基因的转录,使炎症免疫细胞增殖及细胞凋亡减少,从而起到抑制炎症免疫反应的作用。 3、四神丸降低了UC模型大鼠结肠组织中IL-1β的表达,阻碍了中性粒细胞向病变结肠部位的募集和趋化,减少了肠黏膜的损伤,从而有效地促进大鼠肠黏膜的修复,最终达到治疗疾病的作用。
参考文献:
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