文献类型：学位论文

中文题名：当归红芪超滤物延缓老龄大鼠脑衰老及对脑组织MT-DNA缺失表达的影响

作者：周倩倩[1];

第一作者：周倩倩

机构：[1]甘肃中医学院;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：李应东;甘肃中医学院

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：当归;红芪;超滤物;衰老;脑衰老;线粒体DNA

年份：2012

摘要：目的：通过当归红芪超滤膜提取物对自然衰老大鼠脑组织作用的实验研究，探讨本品抗衰老的作用及其机制，从而为该药的开发和推广提供实验依据。 方法：采用3月龄雄性 WISTAR 年轻健康大鼠12只，作为正常年轻对照组（A组）。24月龄雄性 WISTAR 自然衰老大鼠72只，随机分为 6组，每组12只，即老年空白对照组（B 组）、当归红芪超滤膜提取物 5 万分子量组（C 组）、当归红芪超滤膜提取物 10万分子量组（D 组）、当归红芪超滤膜提取物 20 万分子量组（E 组）、当归红芪水煎剂组（F组）、阳性药物对照组（G组）各 12只。将大鼠适应性喂养7天后，A组和B组给予生理盐水（每日 1 次，每次 7ML/KG.D）；C、D、E、F 各组给予相应截留分子量的当归红芪超滤膜提取物和当归红芪水煎剂（每日1次，每次19.428 G生药/KG·D）；G组给予维生素E（每日1次，每次54MG/KG.D）。共给药70天后观察以下指标：1.通过水迷宫实验检测其对学习记忆功能的影响；2.脑指数；3.光镜下脑组织形态学的观察；4.电镜下脑细胞形态学观察；5.生化法测定脑组织中SOD活力，MDA含量；6.用酶联免疫法测定脑组织中神经递质含量；7.用PCR法测定脑组织MT-DNA缺失的表达。 结果：（1）水迷宫检测结果：水迷宫实验分为定向航行实验和空间探索实验。与A组相比，B组搜索到平台的潜伏期延长，穿越平台所在象限的次数明显减少，有显著性差异(P＜0.01)。与B组比较，D，E，F，G组大鼠潜伏期缩短，有统计学意义（P＜0.01）， D、G组大鼠穿越平台所在象限的次数明显增加，有统计学意义（P＜0.01）。 (2) 脑指数结果： A组大鼠与B，C，D，E，F，G各组大鼠相比，脑指数存在差异(P＜0.05)，该结果提示大鼠衰老过程中存在脑萎缩现象。（3）光镜下形态学观察：青年组大鼠神经细胞排列致密整齐，层次分明，可见多层排列细胞；衰老组大鼠神经细胞层次不清楚，排列稀疏、杂乱，脱失明显；用药组大鼠神经细胞层次欠清楚，排列稀疏，有细胞脱失；（4）透射电镜结果：青年组大鼠大脑皮层、海马神经细胞核呈圆形，染色质均一，线粒体、粗面内质网、游离核糖体均正常。衰老组大鼠大脑海马神经元细胞核不规则，核膜内褶，染色质大量聚集成块状，高密度密集于核膜处，出现凋亡现象；皮质神经元细胞器的数量明显减少，线粒体水肿，出现大量脂褐素。与衰老组大鼠比较，用药组大鼠大脑神经元部分核膜形状不规则，染色质欠均一，线粒体轻度水肿。（5）SOD活力结果：与A相比，B组脑组织SOD活力明显降低（P＜0.01）；与B组相比，C，D，E，F，G组脑组织中SOD 活力均显著增高（P＜0.01）；与D组相比，C，E，F组有统计学意义 (P＜0.01)。（6）MDA含量结果：与A相比，B组脑组织中MDA 含量明显升高(P＜0.01)；与B组相比，C，D，E，F，G组脑组织中MDA 含量均显著降低(P＜0.01)；与D组相比，C，E，F组有统计学意义（P＜0.01）。（7）神经递质含量测定：与A组比较，B组脑组织中ACH、DA、NE、5-HT含量显著降低(P＜0.01)；与B组相比，D、E、G组脑组织中ACH、DA、NE、5-HT含量增高，有显著差异(P＜0.01)；与D组相比，C，E组有统计学意义（P＜0.01）。（8）线粒体DNA(MT-DNA)缺失情况：与A组比较，B组脑缺失MT-DNA/ 内参MT -DNA 比例明显增高(P＜0.01) ；与B组相比，D、G组脑缺失MT-DNA/ 内参MT-DNA比例降低(P＜0.01) 。 结论：当归红芪超滤物有延缓老龄大鼠脑组织衰老的作用，10万分子量组优于其它分子量组。