文献类型：学位论文

中文题名：糖止丸对IGT大鼠胰岛素抵抗及胰岛β细胞形态学的影响

作者：杨倩[1];

第一作者：杨倩

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：杨丽霞;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：糖止丸;IGT大鼠;胰岛素抵抗;炎症因子;葡萄糖转运蛋白-4;PI3K/AKT/GSK-3信号通路

年份：2021

摘要：【目的】观察糖止丸(TZW)对STZ诱导糖耐量受损(IGT)大鼠胰岛素抵抗及胰岛β细胞形态学的影响,探讨中药糖止丸对IGT的干预作用及机制。【方法】选取48只SPF级的雄性Wistar大鼠,并适应性喂养7d,随机选8只作为空白(NC)组的大鼠,并以正常饲料喂养,其余给予高脂高糖饲料喂养。喂养21天后,除NC组之外的大鼠断食12小时,腹腔小剂量STZ(20mg/kg,溶于0.1mol/L柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液,p H4.4)注射后,继续给予高脂高糖饲料喂养,NC组进行等剂量柠檬酸缓冲液注射。7d后全部大鼠测其空腹血糖后进行OGTT试验,50%葡萄糖按照2g/kg灌胃,2h后剪尾测其血糖。FPG<5.6mmol/L,OGTT 2h血糖在7.8～11.1mmol/L之间,即IGT模型复制成功。筛选出造模成功的IGT大鼠40只,随机分为:模型、西药、糖止丸低中高剂量组各8只,加空白组8只,共6组,合计48只。成模后糖止丸低、中、高组给予糖止丸(0.25、0.5、1g/kg/d)干预,西药组施以二甲双胍(99mg/kg/d)干预,NC和IGT组的大鼠将按照同体积的生理盐水进行每天灌胃1次,连续28d。末次灌胃后,将各组大鼠禁食不禁水12h后,腹腔注射戊巴比妥麻醉,并进行腹主动脉取血5ml。分离血清、血浆保存于-20℃冰箱待检测。处死后大鼠即时取出胰腺和骨骼肌组织,放入液氮冻存后转入-80℃冰箱保存备用。取胰腺组织观察胰岛组织病理形态变化。ELISA法测定FINS,并计算ISI和HOMA-IR指数;炎症和脂肪细胞因子:TNF-α、IL-1、IL-6、MCP-1、LEP、Resistin。血脂:TC、TG、HDL、LDL水平。Western Blot法检测大鼠骨骼肌PI3K、AKT及GSK-3蛋白表达量。实时荧光定量PCR法检测大鼠骨骼肌组织中GLUT-4 m RNA表达。【结果】(1)糖止丸对各组大鼠FBG、2h PG、FINS、ISI和HOMA-IR指数的影响:与NC组相比,IGT组2h PG指数明显增高(P<0.05)。糖止丸高剂量治疗4周后,对比IGT组可明显看出2h PG指数降低(P<0.01)。与NC组相比,IGT组FINS、ISI和HOMA-IR指数明显增高(P<0.01)。糖止丸低、高剂量和二甲双胍治疗4周后,对比IGT组可明显看出TL组、TH组、MF组的FINS、ISI和HOMA-IR指数降低(P<0.05或P<0.01)。(2)糖止丸对IGT大鼠血脂的影响:与NC组相比,IGT组的HDL指标降低,TC、TG、LDL指数显著升高(P<0.01);糖止丸和二甲双胍治疗4周后,与IGT组相比,TZW干预各组和MF组降低TC、TG、LDL指数并升高HDL(P<0.05或P<0.01)。(3)糖止丸对IGT大鼠炎症因子的影响:与NC组相比较,IGT组大鼠血清中TNF-a、IL-1、IL-6、MCP-1、Resistin、LEP水平含量显著升高(P<0.01)。糖止丸高剂量和二甲双胍治疗4周后,与IGT组比较,TH组和MF组TNF-a、IL-1、IL-6、MCP-1、Resistin、LEP表达均不同程度下降(P<0.01,P<0.05)。(4)糖止丸对IGT大鼠骨骼肌中PI3K、AKT、GSK-3蛋白表达的影响:与NC组相比较,骨骼肌中PI3K、AKT蛋白表达显著降低,GSK-3蛋白表达显著升高(P<0.01)。糖止丸和二甲双胍治疗4周后,与IGT组相比,TZW组和MF组大鼠骨骼肌中PI3K、AKT蛋白表达升高,GSK-3蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。(5)糖止丸对IGT大鼠骨骼肌中GLUT-4 m RNA表达的影响:与NC组相比,IGT组大鼠骨骼肌GLUT-4 m RNA表达显著降低(P<0.01)。糖止丸和二甲双胍治疗4周后,与IGT组相比,TZW各剂量组和MF组可显著升高大鼠骨骼肌GLUT-4 m RNA表达(P<0.01,P<0.05)。(6)糖止丸对IGT大鼠胰腺病理形态的影响:与NC组相比,IGT组大鼠腺泡间隙增大,胰岛组织破损不完整,细胞数量减少且排列紊乱。经糖止丸治疗四周后,与IGT组相比,TZW不同浓度处理组,胰岛组织趋向于排列整齐,损伤程度降低,胰岛细胞结构趋向完整,胰岛β细胞增多,染色均匀,且随药物剂量升高,损伤恢复愈加明显。【结论】通过糖止丸对大鼠治疗4周以后,同IGT组比较,TZW组大鼠可明显看出2h PG、FINS、ISI和HOMA-IR指数降低,血脂中TC、TG、LDL水平出现下降,而HDL水平出现上升,TNF-a、IL-1、IL-6、MCP-1、Resistin、LEP水平均不同程度下降,胰岛组织趋向于排列整齐,损伤程度降低,胰岛细胞结构趋向完整,胰岛β细胞增多,染色均匀,且随药物剂量升高,损伤恢复愈加明显。其可能与升高骨骼肌GLUT-4 m RNA表达水平和调节PI3K/AKT/GSK-3信号通路异常表达的作用机制有关。