文献类型：学位论文

中文题名：不同分子量当归、红芪超滤膜提取物对h<,2>o<,2>致人脐静脉内皮细胞（ecv-304）氧化损伤和hsp<,70>mrna表达的影响

作者：刘清君[1];

第一作者：刘清君

机构：[1]甘肃中医学院;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：李应东;甘肃中医学院

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：当归;红芪;超滤膜提取物;人脐静脉内皮细胞;热休克蛋白基因;过氧化氢;氧化损伤

年份：2008

摘要：目的：观察不同分子量(分子量2万、5万、10万)当归、红芪超滤膜提取物对过氧化氢(h2o2)致人脐静脉内皮细胞(ecv-304)氧化损伤的影响，探讨hsp70mrna表达在此过程中的作用。 方法：以h2o2诱导离体培养的人脐静脉内皮细胞(ecv-304)制备内皮细胞氧化损伤模型，采用四氮唑蓝比色法(mtt法)观察不同分子量、不同浓度当归、红芪超滤膜提取物对h2o2致内皮细胞氧化损伤细胞活性的影响；用黄嘌呤氧化酶法检测细胞中超氧化物歧化酶(sod)活性；用硫代巴比妥酸(tba)法检测细胞中过氧化产物丙二醛(mda)含量；流式细胞术(fcm)分析细胞周期及细胞凋亡率；半定量逆转录-聚合酶链反应(rt-pcr)法检测hsp70mrna的表达。 结果：①0.5mol/l h2o2作用于人脐静脉内皮细胞4h后，其细胞增殖受到抑制，细胞内sod活力降低，mda含量升高；g0/g1期细胞数目明显增加，s期细胞数目减少，细胞凋亡率增加，与对照组比较有显著性差异(p<0.05)。②当归、红芪超滤膜提取物作用于h2o2致内皮细胞损伤模型后，其细胞内sod活力升高，mda含量降低，g0/g1期细胞数目明显减少，s期细胞数目增加，细胞凋亡率降低，且在此过程中伴有hsp70mrna基因表达增强，与损伤模型组比较有显著性差异(p<0.05)，且以5万分子量超滤物作用最明显。 结论：①h2o2对人脐静脉内皮细胞有明显致氧化损伤作用，实验选用h2o2诱导人脐静脉内皮细胞损伤4h为急性氧化损伤模型，与冠心病、高血压病、经皮冠状动脉介入术后再狭窄等病理演变的始动环节相吻合，符合实验要求。②不同分子量当归、红芪超滤膜提取物对h2o2致内皮细胞损伤有明显的保护作用，且以5万分子量超滤物作用最明显。③当归、红芪超滤膜提取物对氧化损伤的保护作用，其作用途径可能与保护了细胞的线粒体，提高了该细胞的抗氧化酶活性，减少过氧化产物的产生，促进细胞增殖修复，降低细胞凋亡率，上调hsp70mrna基因的表达有关。