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当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及enosmrna表达的影响
文献类型:学位论文
中文题名:当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢导致内皮细胞损伤的保护作用及enosmrna表达的影响
作者:魏卓恒[1];
第一作者:魏卓恒
机构:[1]甘肃中医学院;
第一机构:甘肃中医药大学
导师:李应东;甘肃中医学院
授予学位:硕士
语种:中文
中文关键词:当归红芪超滤膜提取物;内皮细胞损伤;ENOSMRNA
年份:2008
摘要:目的:观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(h2o2)损伤人脐静脉内皮细胞(huvec)的保护作用和内皮型一氧化氮合酶(enos)基因在此过程中的作用,探讨其在心脑血管疾病治疗中的机制。 方法:用0.5mmol/lh2o2制造huvec损伤模型;按分组把不同浓度(0.5g/l、1.0 g/l、2.0g/l),不同分子量(2万分子量,5万分子量,10万分子量)的当归红芪超滤膜提取物于损伤后加入,分别测定细胞活力(mtt法)观察归红芪超滤膜提取物对h2o2损伤内皮细胞活性的影响;黄嘌呤氧化酶法检测细胞中超氧化物歧化酶(sod),活力硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(mda)含量;流式细胞仪分析细胞周期,细胞内ca2+含量。半定量逆转录.聚合酶连(rt-pcr)法检测enosmrna表达的变化。 结果:1.0.5mmol/l过氧化氢作用于人脐静脉内皮细胞后,sod活力降低,mda活力升高,g0/g1期细胞的数目明显增加,s期细胞的数目明显减少;细胞内ca2+含量明显增加(p<0.01):细胞凋亡增加(p<0.01);enos基因在转录水平出现表达降低(p<0.01,p<0.05)。2.当归红芪超滤膜提取物对h2o2损伤内皮细胞作用后,sod活力升高,mda活力降低降低,g0/g1期细胞的数目明显减少,s期细胞的数目明显增加;细胞内ca2+含量明显减少(p<0.01)。细胞凋亡降低(p<0.01);enos基因在转录水平出现表达增加(p<0.01,p<0.05)。以5万分子量以下为最佳。 结论:1.h2o2对人脐静脉内皮细胞有明显致损伤作用。2.当归红芪超滤膜提取物对h2o2损伤内皮细胞有明显保护作用。3.机制可能为提高抗氧化酶活性;下调g0/g1期细胞的数目,上调s期细胞的数目,对抗钙超载,降低细胞凋亡,增加enosmrna表达。
参考文献:
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