文献类型：学位论文

中文题名：红景天苷对高原肺水肿大鼠防治作用的研究

作者：王子晗[1];

第一作者：王子晗

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：王荣;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：高原肺水肿;红景天苷;高原缺氧;网络药理学

年份：2023

摘要：高原肺水肿是快速进入高海拔地区时,由于严重急性缺氧引起的一种非心源性肺水肿。它具有急性发作和快速发作的特点,主要发生在3000米以上的高海拔地区,发病率为2%,严重威胁着在高海拔工作人员的生命健康。因此,研究高原肺水肿具有重要意义。缺氧环境和剧烈运动是导致高原肺水肿发作的主要因素。红景天苷是抗缺氧药物红景天胶囊的主要药理成分,具有显著的抗缺氧和抗氧化作用,但对于高原缺氧所致高原肺水肿的保护作用尚不明确,因此,本课题将探讨红景天苷对高原肺水肿的防治作用,为高原肺水肿提供新的治疗药物,对提高高原作业人群的健康水平具有重要意义。本论文将通过以下三部分进行了相关研究。第一部分:红景天苷对急进高原大鼠肺组织的保护作用Wistar大鼠在12h内从海拔1500 m紧急送往海拔4010 m的高原野外实验室,建立大鼠快速进入高海拔缺氧模型。通过检测血气指标、氧化应激、炎症因子及病理损伤,探究给予不同浓度红景天苷对高原急进缺氧大鼠肺组织损伤的防治作用。研究结果发现:与平原组比较,急进高原大鼠动脉血氧分压、血液酸碱度、标准碳酸氢盐和实际碳酸氢盐水平显著下降,血红蛋白水平显著上升(均P<0.05),血氧饱和度显著下降了9.85%(P<0.01);模型对照组肺组织中GSH含量减少了37.83%(P<0.01),T-SOD含量减少了35.25%(P<0.01),MDA含量显著增加了22.22%(均P<0.01);血清炎症因子MCP-1、IL-6和IL-1β含量显著增加,γ干扰素含量显著减少(均P<0.01)。与缺氧模型组比较,红景天胶囊与各个剂量组红景天苷大鼠动脉血氧饱和度升高,红景天苷高剂量组相较于缺氧对照组大鼠动脉血氧饱和度上升了4.39%(P<0.01),血液酸碱度、标准碳酸氢盐、实际碳酸氢盐明显上升,血红蛋白水平明显下降;肺组织中谷胱甘肽和总超氧化物歧化酶含量明显上升,丙二醛含量明显下降;血清炎症因子MCP-1、IL-6和IL-1β含量明显下降,干扰素γ含量明显上升。HE染色结果显示急进高原大鼠肺泡腔内可见渗出物及大量炎症细胞、红细胞渗出,部分肺隔间增厚,支气管上皮杂乱,支气管腔狭窄、变形,大量炎性细胞聚集;给予红景天胶囊和不同剂量红景天苷后,肺泡腔内渗出物和炎症细胞减少,红细胞渗出减少,细胞壁逐渐变薄,肺泡壁逐渐完整,肺组织病理损伤得到明显改善。缺氧模型组大鼠Occludin蛋白含量较空白对照组显著降低(P<0.05),红景天苷高剂量组Occludin蛋白含量较缺氧模型组显著升高(P<0.01)。第二部分:红景天苷对高原肺水肿的防治作用大鼠急进高原后进行强制运动建立高原肺水肿模型,通过检测肺含水量、BALF中蛋白及炎症因子水平、组织氧化应激及病理损伤,评价不同剂量红景天苷对高原肺水肿的防治作用。研究结果表明:与平原组相比,高原肺水肿模型组大鼠肺含水量增加了1.51%(P<0.01),肺组织中支气管肺泡灌洗蛋白含量明显升高了147.62%(P<0.01),炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著增加(均P<0.01),肺组织中谷胱甘肽和总超氧化物歧化酶含量显著下降,丙二醛含量显著增加(均P<0.01),给予各剂量红景天苷、红景天胶囊和地塞米松后,大鼠肺组织含水量、肺泡灌洗液中蛋白含量、炎症因子和氧化应激指标较高原肺水肿模型组均有不同程度改善作用。给予各剂量红景天苷后肺组织含水量显著下降(均P<0.01)。HE染色结果显示,与平原对照组相比高原肺水肿模型大鼠肺泡腔有大量水肿液,肺泡壁毛细血管小静脉扩张,给予红景天苷、红景天胶囊、地塞米松后,肺组织中的损伤状况得到缓解。第三部分基于网络药理学探究红景天苷预防和治疗高原肺水肿作用机制依据网络药理学来筛选红景天苷治疗高原肺水肿的潜在靶点,运用Western Blot实验方法来检测Akt/PI3K/m TOR通路的变化,探讨红景天苷防治高原肺水肿的作用机制。通过网络药理学分析,红景天苷与高原肺水肿的主要共同靶点为AKT1、VEGFα、TNF、MMP-9、IL-6等;红景天苷防治高原肺水肿作用主要涉及流体剪切应力与动脉粥样硬化、癌症的途径、PI3K-AKT等信号通路。WB实验结果显示,与空白对照组相比,高原肺水肿模型组大鼠肺组织中p-AKT1、p-PI3k和p-m TOR表达含量上升,给予各剂量红景天苷后,蛋白表达量下降。红景天苷防治高原肺水肿可能是通过PI3K/AKT/m TOR信号通路发挥作用。通过本论文研究,获得以下结论:1.红景天苷可改善急进高原大鼠缺氧状态,纠正酸中毒,抑制炎症反应和氧化应激,对高原缺氧所致肺组织损伤具有保护作用。2.红景天苷可缓解高原肺水肿大鼠肺组织含水量、BALF中总蛋白含量和炎症因子的升高,改善肺部病变,具有防治高原肺水肿的作用。3.红景天苷防治高原肺水肿的机制可能通过下调PI3K/Akt/m TOR信号通路来抑制炎症因子发挥作用。