文献类型：学位论文

中文题名：基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黑逍遥散防治AD的免疫炎症机制研究

作者：李晓[1];

第一作者：李晓

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：安耀荣;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：黑逍遥散;阿尔茨海默病;免疫炎症;Wnt/β-catenin信号通路

年份：2022

摘要：目的:复制AD大鼠模型,观察黑逍遥散能否通过“肾肝脾三脏同调”缓解AD模型大鼠学习和记忆能力障碍,达到改善AD模型大鼠的学习记忆的目的;探究黑逍遥散能否通过激活Wnt/β-catenin信号通路,干预AD模型大鼠海马区炎症反应,保护神经细胞,进而保护海马组织结构。方法:选择90只雄性Wistar大鼠,先分别选择12只大鼠随机分为空白组和假手术组,其他剩余大鼠在左右两侧海马CA1区注射Aβ42溶液复制AD模型大鼠,假手术组在相同注射点注射等体积的生理盐水。造模结束后,待所有造模大鼠伤口愈合后,用Morris水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期,以假手术组平均潜伏期为标准,筛选出大于此值的记忆障碍的大鼠,作为造模成功的大鼠。然后将造模大鼠随机分为模型组、黑逍遥散低、中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组,每组12只,并连续42天给予相应剂量黑逍遥散和盐酸多奈哌齐灌胃。灌胃结束后,Mirror水迷宫实验检测1～5天大鼠逃避潜伏期的变化和第6天的空间探索能力。待行为学实验全部结束后,各组大鼠ip3%戊巴比妥钠（35 mg/kg）麻醉,腹主动脉取血,离心,取上清,于-80℃冰箱保存;取血后将大鼠颈椎脱臼处死,取海马组织和全脑。尼式染色观察海马CA1区神经元的病理结构改变;Elisa法检测大鼠海马组织和血清中IL-6、IL-10、TNF-α的表达;Western blot法检测检测海马中GSK-3β、β-catenin、PPARγ的蛋白表达水平;RT-PCR检测大鼠海马区GSK-3β、β-catenin、PPARγmRNA的水平。结果:与模型组比较,黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组大鼠第2～5天逃避潜伏期时间显著缩短（P<0.05）,跨越平台次数显著增多（P<0.05）;黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组大鼠的海马CA1区神经元明显排列紧凑,尼氏小体增多,差异较为明显;黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组大鼠海马组织和血清中IL-10的表达水平显著升高,IL-6和TNF-α明显降低（P<0.05）;黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组大鼠海马中GSK-3β蛋白和GSK-3βmRNA表达显著降低,β-catenin、PPARγ的蛋白和β-catenin、PPARγmRNA表达水平明显升高（P<0.05）。盐酸多奈哌齐组与黑逍遥散高剂量组之间各指标比较无差异（P>0.05）。结论:（1）黑逍遥散可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路干预AD大鼠海马区炎症反应,保护海马组织,保护神经细胞,改善AD大鼠认知和记忆功能障碍;（2）黑逍遥散可能通过“肾肝脾三脏同调”一定程度上缓解大鼠的记忆障碍,改善AD大鼠认知和记忆功能。