文献类型：科技成果

中文题名：基于PI3K/AKT/Foxo3a通路研究左归丸治疗放射诱导的临床功能早衰的分子机

完成人：赵粉琴[1];李淑萍[1];刘立[1];谢知慧[1];贾学玲[1];温晓辉[1];张小花[1];申剑[1];彭凤娣[1];赵艳[1];刘洁颖[1];安明霞[1];丁晓南[1];

第一作者：赵粉琴

完成机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

年份：2024

语种：中文

中文关键词：早衰;卵巢功能衰竭;左归丸治疗

摘要：①课题来源：2017年国家自然科学基金地区基金项目（基于PI3K/AKT/Foxo3a通路研究左归丸治疗放射诱导的临床功能早衰的分子机制）;基金编号：81760806背景：女性的卵巢是产生卵子和分泌性激素的性腺，具有生育和内分泌双重功能，而且卵巢对内外环境变化比较敏感，易受各种理化因素的损害。尤其是近几年妇科恶性肿瘤的治疗，64%的成年女性病人经历肿瘤治疗后伴随一项或多项卵巢功能衰竭的症状，而卵巢功能早衰（Premature ovarian failure，POF）是放、化疗损伤导致的最普遍的远期后遗症，其表现症状为女性患者出现月经稀发，闭经，不孕、心血管系统疾病以及骨质疏松等，严重影响患者的生殖健康和生活质量。放化疗导致的POF是妇科肿瘤领域非常关注而且亟待解决的难题之一。②研究目的和意义：放疗造成卵巢功能早衰（POF）主要是卵母细胞凋亡导致卵泡闭锁，继发卵巢萎缩伴原始卵泡贮备减少的现象，近期对生殖健康响，长期缺乏雌激素对女性骨密度，心血管和神经系统都有严重影响。已证实3.2Gy射线（LD20）辐射剂量，作用于卵巢可导致卵巢组织学和血清激素水平变化。磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸激酶/雷帕霉素的哺乳动物靶标（PI3K/Akt/mTOR）通路在颗粒细胞凋亡和卵泡发育过程中起重要作用，此信号通路分子异常表达可能会激发卵泡快速凋亡，导致POF发生。雌激素替代已经成为治疗POF的主要手段，但其诱发乳腺癌和子宫内膜癌的高风险，限制其在临床使用。中医学认为电离辐射损伤的病机是热毒蕴结阴分，脾肾造化不及，气血受损，与现代医学放疗副作用胃肠道反应和骨髓抑制发病机理一致。对生殖功能损伤表现为肾气亏虚，生精乏源，脾失健运，气血生化乏源，无以充养生殖之精，亦可致生殖功能低下，甚至不育。所以研究辐射致卵巢损伤的分子机制以及中医药对其长期的保护作用就显得尤为重要。③主要论点和论据：左归丸为经典补肾古方，基于肾主生殖，主骨生髓理论，临床已经用于治疗妇女绝经综合征、卵巢早衰、骨质疏松等衰老性疾病。已有理论研究左归丸“补肾生脉”功效，上调早衰大鼠卵巢血管内皮生长因子，上调化疗损伤大鼠卵巢缝隙连接蛋白，加强颗粒细胞对卵母细胞蛋白信息传导和营养，上调颗粒细胞Bcl-2蛋白、细胞周期Smad4蛋白和Cyclin A蛋白，直接或者间接达到促卵泡发育，治疗卵巢早衰的作用。研究结果显示：1）激活PI3K/AKT/Foxo3a信号通路可以上调卵巢组织PI3K、Akt、Foxo3a、Bcl-2、CDK2和TAP63蛋白表达，下调p27蛋白表达，但并没有促进体外培养卵泡发育。2）辐射损伤抑制骨髓造血、促进卵巢颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁，导致卵巢功能快速衰退，左归丸通过刺激骨髓造血，促进卵巢组织TAP63蛋白表达，激活Bcl-2基因抑制颗粒细胞和卵母凋亡，增加颗粒细胞合成雌激素，达到促进卵巢功能修复的作用。3）左归丸可通过抑制卵巢组织凋亡和p53蛋白表达，促进初级卵泡发育，增加血清雌二醇含量，降低血清卵泡雌激素，达到缓解辐射损伤卵巢的作用。4）左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/Foxo3a蛋白表达，增加bcl-2蛋白量和抑制bax蛋白表达有关。④创见与创新：使用的雌激素替代疗法以缓解雌激素缺乏造成的各种绝经后症状，这是治疗生理性和病理性卵巢功能衰退的主要方法，但长期应用雌激素的副作用有乳腺癌、子宫内膜癌、心脑血管病及血栓栓塞性疾病等。左归丸经典补肾填精、通脑益髓功效，在促进卵泡发育形成，促进下丘脑-垂体-卵巢性腺轴功能恢复方法已经有研究。基于中医药在辐射损伤治疗注重补益滋阴药和活血化瘀药为主，左归丸对辐射卵巢的保护作用是通过激活卵巢组织内PI3K/Akt/Foxo3a信号蛋白表达，化生气血，充养正气，长养脏腑，促卵母细胞和颗粒细胞增值，促进残存卵泡发育，恢复受损卵巢。⑤社会经济效益，存在的问题：中医药防治卵巢功能早衰的研究很多，其作用机制可能与其调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能、改善机体神经-内分泌-免疫网络功能及中药复方整体调节机体内环境等因素有关。左归丸对卵巢衰退调节作用不仅仅局限于补肾，可能是通过整体调节、使用安全、没有毒副作用、费用相对低等，有着良好的发展前景。左归丸适用于各种原因导致的卵巢功能下降引起的各种临床综合征。市售药品已经很普及，口服使用方便，疗效显著，适合各类医院、社区门诊普遍使用。存在问题：1）实验卵巢组织培养实验不太理想，可能与卵巢组织体外培养条件下，组织坏死有关。2）该研究主要从卵巢组织病理学、凋亡率以及颗粒细胞和卵母细胞凋亡、血清性激素水平以及卵巢组织PI3K/Akt/Foxo3a蛋白表达方面研究辐射对卵巢的损伤以及左归丸的干预作用，但是不同剂量辐射损伤以及不同时间段损伤的相关性没有做研究。3）该研究采用的是动物实验，建议开展临床资料收集，研究用左归丸对放疗后卵巢损伤的修复作用的机制以及时效性。4）有望改进实验方法和检测技术，更进一步辐射损伤的分子机制以及细胞凋亡的电镜下细胞结果的变化、卵巢组织全基因甲基化表现以及左归丸的干预作用。⑥历年获奖情况：获得2020年，2021年皇甫谧科学技术二等奖各1项，2022年皇甫谧科学技术三等奖1项。