文献类型：学位论文

中文题名：黄芪多糖对三阴性乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤生长抑制作用的研究

作者：谢荣丹[1];

第一作者：谢荣丹

机构：[1]甘肃中医药大学;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：龙凤;甘肃中医药大学

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：三阴性乳腺癌;移植瘤;细胞凋亡;黄芪多糖;MDA-MB-231

年份：2019

摘要：目的：通过建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型，观察黄芪多糖(Astragalus polysaccharides，APS)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株裸鼠移植瘤生长抑制作用及其对肿瘤细胞凋亡的影响，研究黄芪多糖抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231生长、诱导其凋亡的作用及其可能分子机制。　　方法：将人乳腺癌细胞MDA-MB-231注射于BALB/c-nu裸鼠右侧腋窝皮下建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型，乳腺癌裸鼠移植瘤瘤体生长达100mm3时，将乳腺癌移植瘤裸鼠随机分为三组，模型组(M组：予0.9%生理盐水)、APS低剂量组(A组：予200mg?kg-1APS药物)、APS高剂量组(B组：予400mg?kg-1APS药物)，每组6只;另选取6只正常裸鼠设为正常组(N组：予0.9%生理盐水);每天灌胃给药200μL，连续21天;给药期间，每隔2天观察记录裸鼠体重并测量瘤体大小。实验结束，观察比较APS低、高剂量组与模型组乳腺癌裸鼠体重、肿瘤质量、瘤体体积的变化，计算肿瘤抑制率及各组裸鼠脾脏指数;苏木精-伊红(HE)染色观察乳腺癌肿瘤组织及各组裸鼠肝肺组织的细胞形态学改变;原位末端标记法(TUNEL)检测乳腺癌肿瘤组织中细胞产生的凋亡;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测乳腺癌肿瘤组织中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase等的表达水平。　　结果:　　(1)APS药物干预后，APS低、高剂量组乳腺癌裸鼠移植瘤体的质量和体积与模型组比较均减小，差异具有统计学意义(P＜0.05)，APS低、高剂量组的肿瘤抑制率分别是37.9%和59.57%;(2)APS药物干预后，APS低、高剂量乳腺癌裸鼠的脾指数与模型组比较均有增加(P＜0.05);而APS低、高剂量组与正常组裸鼠脾指数比较则差异没有统计学意义(P＞0.05);(3)HE染色检测实验中部分组织的细胞形态学变化。经观察发现，APS低、高剂量组的肿瘤组织出现明显细胞凋亡状态，凋亡细胞增多。同时，肝、肺组织细胞形态与结构均正常，肿瘤细胞未见肝、肺组织转移;(4)TUNEL检测乳腺癌肿瘤组织中细胞凋亡情况。实验证实了APS能导致乳腺癌肿瘤组织细胞发生凋亡;同时APS低、高剂量组肿瘤组织细胞凋亡率增加，与模型组相比差异具有统计学意义(P＜0.01);(5)Westernblot检测乳腺癌肿瘤组织中凋亡相关蛋白的表达，经实验研究发现，相比较于模型组，APS低、高剂量组肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达量减少(P＜0.05)，同时Bax、Caspase-9及Caspase-7的蛋白表达量增加(P＜0.05);结论：　　(1)APS在体内能有效抑制MDA-MB-231人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长，其机制可能与APS能诱导人乳腺癌MDA-MB-231肿瘤组织细胞发生凋亡相关;(2)APS通过剂量依赖性地影响人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠肿瘤组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-9及Caspase-7的表达水平，参与乳腺癌细胞的线粒体凋亡途径，促进了乳腺癌肿瘤组织细胞发生凋亡，进而抑制人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤的生长。