文献类型：学位论文

中文题名：黄芪多糖对辐射致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制探讨

作者：畅艳娜[1];

第一作者：畅艳娜

机构：[1]甘肃中医学院;

第一机构：甘肃中医药大学

导师：李应东;甘肃中医学院

授予学位：硕士

语种：中文

中文关键词：黄芪多糖;辐射;心肌细胞;线粒体

年份：2014

摘要：目的：探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharide，APS）对辐射所致心肌细胞损伤的可能保护作用及其机制。 方法：原代提取Wistar乳鼠心肌细胞，密闭培养于37、5%CO2培养箱中，取对数生长期的心肌细胞，用X线照射心肌细胞建立辐射损伤模型，用不同浓度的APS进行干预。实验分五组：正常对照组;辐射损伤模型组（照射剂量为6Gy）;黄芪多糖低剂量干预组（终浓度为0.025mg/mL）;黄芪多糖中剂量干预组（终浓度为0.05mg/mL）;黄芪多糖高剂量干预组（终浓度为0.1mg/mL）。MTT法检测各组心肌细胞生长抑制率;流式细胞仪(Flow Cytometry，FCM)检测各组心肌细胞的细胞周期和细胞凋亡;激光共聚焦（laser confocal microscope，LSCM）检测各组心肌细胞线粒体功能;DCFH-DA荧光探针检测各组心肌细胞ROS表达水平;蛋白印迹法检测各组心肌细胞内CytC、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达。 结果：正常心肌细胞呈圆形、梭形及多边形等多种形态，细胞之间通过伪足相互交织成网，呈簇状生长。辐射损伤后心肌细胞部分变圆、漂浮、开始出现凋亡。与正常对照组相比，辐射损伤组心肌细胞生长抑制率明显升高、细胞周期延长、凋亡增加、线粒体功能异常、线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential，ΔΨm）降低、ROS表达及CytC，Caspase-3，Caspase-9蛋白的相对表达量明显升高，差异具有显著性（p＜0.05）。与辐射损伤组相比，黄芪多糖（APS）各干预组心肌细胞生长抑制率均不同程度下降、细胞周期均不同程度缩短、凋亡减少、线粒体功能有所改善，线粒体膜电位（ΔΨm）有所升高、ROS表达及CytC，Caspase-3，Caspase-9蛋白的相对表达量均不同程度降低（p＜0.05）。 结论： 1．黄芪多糖（APS）可以通过清除ROS、缩短细胞周期、促进心肌细胞增殖、稳定线粒体膜电位、降低CytC，caspase-3，caspase-9蛋白的表达、降低凋亡比率来达到对辐射致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用。 2．黄芪多糖可以通过扶正固本、益气养阴、活血化瘀的功效减轻放射线的损伤。